In vitro effect of Chrysosporium indicum and Chrysosporium keratinophylum on Toxocara canis eggs / Efecto in vitro de Chrysosporium indicum y Chrysosporium keratinophylum sobre huevos de Toxocara canis

The degree of antagonism exercised by fungi on geohelminth development varies according to the morphological alterations caused by different fungal species. Saprophytic fungi may exert ovicidal or ovistatic effects. The aim of this study was to apply scanning electron microscopy (SEM) to observe the action of two soil saprophytic species of Chrysosporium (C. indicum and C. keratinophylum) on Toxocara canis eggs. The fungal strains to be tested were incubated for 28 days at 28 °C in 2% water agar with a suspension of unembryonated T. canis eggs. A suspension of T. canis eggs in 2% water agar was used as control group. The assay was done in triplicate for each fungus and the control group. SEM observations were performed on the 4th, 7th, 14th, 21st, and 28th day after inoculation. The effect of the fungi on eggs was evaluated in accordance with the alterations observed on the surface and the changes in the normal characteristics of the eggs. Hyphae around the eggs, appresoria penetrating the shell and changes in the typical egg membrane were observed in this assay. Type 3 effect (alterations that occur both in the embryo and the shell, and hyphal penetration of the eggs) was the prevalent effect. SEM allowed us to observe clearly the morphological alterations in T. canis eggs due to the effect of C. indicum and C. keratinophylum. Both saprophytic species of Chrysosporium alter the egg structure and alterations increase as exposure increases.

El grado de antagonismo ejercido por los hongos sobre el desarrollo de los geohelmintos depende de la especie fúngica y las alteraciones morfológicas que causan. Los hongos saprofitos pueden tener efecto ovicida u ovistático sobre los huevos. El objetivo fue aplicar la microscopía electrónica de barrido (MEB) para observar la acción de 2 especies de Chrysosporium (C. indicum y C. keratinophylum) saprofitas de suelos, sobre huevos de Toxocara canis.Las especies a ensayar se sembraron en agar agua al 2% con una suspensión de huevos no embri-onados de T. canis y se incubaron 28 días a 28 °C. Como grupo control se utilizó una suspensión de huevos de T. canis en agar agua al 2%. El ensayo se realizó por triplicado para cada hongo y el grupo control. Las observaciones con MEB se realizaron a los 4, 7, 14, 21 y 28 días de incubación. La acción de los hongos se evaluó según las alteraciones en la superficie y los cambios en las características normales de los huevos. En este ensayo se observaron: hifas rodeando los huevos, appresorios penetrando la cubierta y cambios en la membrana característica del huevo, prevaleciendo el efecto tipo 3 (alteraciones que se producen tanto en el embrión como en la cubierta y penetración de hifas al interior de los huevos). La aplicación de la MEB permitió observar claramente que las 2 especies de Chrysosporium saprofitas de suelos, afectan el normal desarrollo de los huevos de T. canis, alteran su estructura y las alteraciones aumentan con el tiempo de exposición.

An evaluation of the dot-ELISA procedure as a diagnostic test in an area with a high prevalence of human Toxocara canis infection

The aim of this work was to evaluate a dot-enzyme-linked immunosorbent assay (dot-ELISA) using excretory-secretory antigens from the larval stages of Toxocara canis for the diagnosis of toxocariasis. A secondary aim was to establish the optimal conditions for its use in an area with a high prevalence of human T. canis infection. The dot-ELISA test was standardised using different concentrations of the antigen fixed on nitrocellulose paper strips and increasing dilutions of the serum and conjugate. Both the dot-ELISA and standard ELISA methods were tested in parallel with the same batch of sera from controls and from individuals living in the problem area. The best results were obtained with 1.33 µg/mL of antigen, dilutions of 1/80 for the samples and controls and a dilution of 1/5,000 for the anti-human IgG-peroxidase conjugate. All steps of the procedure were performed at room temperature. The coincidence between ELISA and dot-ELISA was 85 percent and the kappa index was 0.72. The dot-ELISA test described here is rapid, easy to perform and does not require expensive equipment. Thus, this test is suitable for the serological diagnosis of human T. canis infection in field surveys and in the primary health care centres of endemic regions.

Toxocara canis y asma bronquial / Toxocara canis and bronchial asthma

A fin de evaluar la relación entre la infección por Toxocara canis y los síntomas del asma bronquial en niños de una región subtropical con alta prevalencia de toxocariosis, se estudiaron 47 niños con asma y 53 sin asma como grupo control. Se efectuó el examen físico completo, registrándose datos clínicos y epidemiológicos. En los niños con asma se categorizó el patrón de presentación, frecuencia y gravedad de los síntomas con una escala de I a IV. Se investigó la presencia de anticuerpos anti-Toxocara canis en ambos grupos mediante el método de ELISA en fase sólida, empleando antígeno de excreción/secreción y se efectuó dosaje de Ig E total. Los resultados muestran una seropositividad del 55% en el total de los niños, del 57.4% en los niños con asma y del 52.8% en los controles. En los niños con sintomatología más grave (grado II, III y IV) hubo un 67.7% de seropositivos, mientras que en los niños con síntomas de grado I la seropositividad fue de 37.5% (p = 0.0470). La infección por T. canis actuaría como un co-factor agravante de los síntomas del asma bronquial.

In order to evaluate the association between the infection by Toxocara canis and the symptoms of asthma in children from a subtropical region with high prevalence of toxocariasis, 47 asthmatic children and 53 non-asthmatics as a control group were studied. A complete physical examination was performed and clinical and epidemiological data were registered. In asthmatic children the frequency and severity of symptoms were classified in grades I to IV. The presence of anti-Toxocara canis antibodies in both groups was evaluated employing a solid phase ELISA method with excretion/secretion antigens, and total Ig E was also measured. Results showed a total seropositivity of 55%, 57.4% in children with asthma and 52.8% in the control group. Among asthmatics with severe symptoms (grade II, III and IV), there was a 67.7% of seropositivity while in children with symptoms of grade I there was a 37.5% (p = 0.0470). The infection with T. canis could act as a co-factor increasing the severity of the symptoms of bronchial asthma.

Infección por toxocara canis en población adulta sana de un área subtropical de Argentina / Toxocara canis infection in adult healthy population from a subtropical area in Argentina

La toxocarosis es un problema sanitario presente en todo el mundo. Sin embargo, por tratarse de una patología que no es de notificación obligatoria y por la existencia de casos asintomáticos, las cifras de prevalencia real en Argentina no son bien conocidas y por ello la toxocariasis tiene un escaso reconocimiento como problema de salud pública. El objetivo del presente trabajo fue determinar la seroprevalencia en adultos sanos de una ciudad subtropical del Nor-Este de Argentina, en la que estudios previos indican que la infección infantil por Toxocara canis es frecuente y que la contaminación de suelos está presente. Se estudiaron 355 sueros de donantes de sangre (325 hombres y 30 mujeres), con edades entre 18 y 68 años, de un Banco de Sangre privado de la ciudad de Resistencia. Se efectuó enzimoinmunoensayo empleando antígenos de excresión/secresión de larvas L2 de T. canis confirmándose mediante Western blot. De los 355 sueros estudiados, 138 fueron positivos (127 hombres y 11 mujeres), lo que significa una prevalencia global de infección del 38,9 por ciento; no se encontró diferencia significativa en relación con el género (39,1 por ciento en hombres - 36,7 por ciento en mujeres). Como el muestreo correspondió íntegramente a población adulta, no se consideró de interés discriminar los valores de positividad según franjas etarias. Los resultados encontrados resultan compatibles con las características urbanas y ambientales del área del estudio y con los hábitos socio-culturales de sus habitantes, y señalan una fuerte presencia del ascárido, con un importante grado de exposición por parte de sus pobladores.

Toxocara seroprevalence in children from a subtropical city in Argentina

Most studies from Argentina have focused on toxocariasis as an environmental problem of big cities, and there are no available data about children infection from small or middle-sized cities. In order to assess the prevalence of anti-Toxocara antibodies in infantile population, 206 children from Resistencia, of both sexes, aged 1-14 years old were studied by Elisa testing with E/S T. canis L2 antigens. Hematological parameters and immunoglobulin levels were determined; five days' stool samples were studied and epidemiological data were obtained by means of a questionnaire to parents. Results showed that 73 per cent of the children had one or more dogs living at home, 57 per cent reported geophagia and 37.9 per cent were positive for Toxocara serology, but there was no significant difference in prevalence neither for boys and girls, nor concerning age. An increased risk of infection was observed in age groups 5-6 and 7-8 for boys, and in age groups 3-4 and 5-6 for girls.